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關(guān)于我們首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 生化試劑 > 抗生素 > FS0012Hygromycin B 潮霉素B(抗生素)
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  • Hygromycin B 潮霉素B(抗生素)
  • 型號(hào):FS0012
  • 報(bào)價(jià):600
  • 地區(qū):上海市
  • 0
  • Hygromycin B 潮霉素B(抗生素)用于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)溶解后過濾除菌。推薦溶劑水,PBS溶液。蛋白質(zhì)合成抑制劑,可用于植物細(xì)胞培養(yǎng)等生化研究。CAS : 31282-04-9
  • 021-34600120
產(chǎn)品詳細(xì)介紹

Hygromycin B 潮霉素B(抗生素)

產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

價(jià)格(元)

FS0012-1G

Hygromycin B 潮霉素B(凍干粉)

1g

600.00

FS0012-5G

Hygromycin B 潮霉素B(凍干粉)

5g

2400.00

FS0012-10G

Hygromycin B 潮霉素B(凍干粉)

10g

3840.00

FS0012-10ML

Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B50 mg/ml

10ml

680.00

FS0012-20ML

Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B50 mg/ml

20ml

1050.00

    

性狀/儲(chǔ)存

-20℃保存(干粉),4℃保存(液體)

產(chǎn)品屬性:

別名 : 濕霉素乙 效高素 潮霉素B干粉
英文名稱 : Hygromycin B
CAS : 31282-04-9
儲(chǔ)存條件 : -20℃

Hygromycin B 潮霉素B(抗生素)生物應(yīng)用 

1)   篩選和維持培養(yǎng)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Hph+載體的原核細(xì)胞或真核細(xì)胞(植物細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞); 

2)   由于作用模式的差異,常與G418 (GeneticinTM),Zeocin blasticidin S聯(lián)合使用,篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染兩個(gè)不同載體的細(xì)胞株;

雙抗性穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選的抗生素作用機(jī)制及抗性

抗生素

抗性機(jī)制

抗性基因

哺乳動(dòng)物篩選濃度

潮霉素B

干擾70S核糖體易位和誘導(dǎo)對(duì)mRNA模板的錯(cuò)讀

Hph

200~500μg/mL

G418

干擾80S核糖體功能和抑制蛋白合成

Tn5/Tn601

100~1000μg/mL

Zeocin

摻入或者切割DNA引起細(xì)胞死亡

Sh ble

50~100μg/mL

blasticidin S

核糖體上抑制肽鍵形成

Bsd/BSD

3~50μg/mL

3抗病毒劑,由于潮霉素B選擇性滲透進(jìn)入病毒感染增強(qiáng)通透性的細(xì)胞,而且具有抑制翻譯的功效;

4)作為驅(qū)蟲藥加入動(dòng)物飼料; 

應(yīng)用濃度 

潮霉素B用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化。推薦使用濃度為50-1000 μg/mL,濃度需要?dú)缜€來確定。 

哺乳動(dòng)物細(xì)胞·200-500 μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞·100-300 μg/mL;真菌·300-1000μg/mL; 

產(chǎn)品使用

使用一:殺滅曲線確定殺死濃度(僅作參考,因個(gè)人檢測(cè)體系而異)

1)往組織培養(yǎng)級(jí)的96孔板內(nèi)加入未轉(zhuǎn)染細(xì)胞,細(xì)胞密度約50-200細(xì)胞/;細(xì)胞貼壁之后,往每孔加入含不同濃度(如50-1000μg/mL,至少5個(gè)濃度)潮霉素B200μL新鮮培養(yǎng)基;

237,5% CO2培養(yǎng)箱孵育細(xì)胞10-14天;

3)培養(yǎng)5-7天后更換新的培養(yǎng)液,培養(yǎng)液內(nèi)含有相應(yīng)濃度的潮霉素B;

410-14天后使用細(xì)胞增殖方法如MTT,CCK-8等評(píng)估細(xì)胞活力;也可以通過檢測(cè)細(xì)胞克隆數(shù)或百分比匯合率來確定毒性效應(yīng)。一般選擇在10-14天能夠殺死所有細(xì)胞的zui小濃度為篩選濃度。

使用二:篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞

(1)對(duì)于貼壁細(xì)胞,直接吸去60mm培養(yǎng)皿內(nèi)的轉(zhuǎn)染細(xì)胞培養(yǎng)基,然后加入含有潮霉素B的新鮮培養(yǎng)基5-6ml;對(duì)于懸浮細(xì)胞,無(wú)菌條件250x g,離心10min除去舊的轉(zhuǎn)染細(xì)胞培養(yǎng)基,然后懸浮在約5ml的含潮霉素B的新鮮培養(yǎng)基;

(2)5-7天后,如上方法更換含有潮霉素B的新鮮培養(yǎng)基;

(3)再孵育細(xì)胞5-7天;

(4)10-14天孵育后,培養(yǎng)體系中只含有能夠表達(dá)潮霉素B抗性表型的活細(xì)胞。因此篩選之后如步驟一,更換不含潮霉素B的新鮮培養(yǎng)基。 

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