線粒體膜電位熒光探針是我們的膜標記1-43的縮寫,化學上稱為N-(3-三乙基氨基丙基)-4-(4-(二丁基氨基)苯乙烯基)吡啶鎓二溴化物。它是一種水溶性膜探針,屬于苯乙烯基染料家族。它廣泛用于細胞生物學和神經生物學,因為它對細胞的毒性極小。線粒體膜電位熒光探針在水性介質中幾乎不發(fā)熒光,并且在與膜結合后強烈發(fā)熒光。它用標準熒光素光學濾光片有效激發(fā),并且當與質膜結合時表現出強烈的熒光信號。線粒體膜電位熒光探針經常被用于量化神經元中的胞吐作用。
線粒體膜電位熒光探針是一種新型的用來監(jiān)測線粒體膜電位變化的熒光探針,是JC-1的*替代物。與JC-1相比,具有以下幾個重要優(yōu)勢:
1、溶解性得以改良,在水溶液中形成沉淀可能性明顯降低;
2、使用更方便,簡化步驟將手動操作時間最小化;
3、熒光信號更高,改良的信號與背景熒光的信噪比;
4、結果更穩(wěn)定,優(yōu)化探針以保證更連續(xù)性和穩(wěn)定性結果。
使用方法:
1、染色液制備:
①儲存液制備:用DMSO或無水乙醇配置濃度1~5 mM的儲存液。例如,取10mg 熒光探針(Mw:460.31 g/mol)溶于4.35ml 無水DMSO中,充分溶解,即得到5mM的儲存液。
?、诠ぷ饕褐苽洌河煤线m的緩沖液稀釋儲存液,調整到合適的工作濃度。
2、染色方法:
對于細菌染色,最好取對數生長期的健康細菌,用無菌PBS或其他適當平衡鹽緩沖液稀釋到~1 x 106cells/ml。也可直接從細菌培養(yǎng)液中取適量的細菌不經清洗進行稀釋。細菌染色用熒光探針的工作濃度可為30μM,室溫染色15~30min。