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公司動態(tài)首頁 > 公司動態(tài) 詳細(xì)分析轉(zhuǎn)染試劑的應(yīng)用以及使用效果
  • 詳細(xì)分析轉(zhuǎn)染試劑的應(yīng)用以及使用效果
  • 點擊次數(shù):3601 更新時間:2019-08-22
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  •    轉(zhuǎn)染試劑是一種新結(jié)構(gòu)類型的DNA轉(zhuǎn)染試劑。該轉(zhuǎn)染試劑為陽離子聚合物和脂質(zhì)體的雜合體,具有轉(zhuǎn)染效率高、重復(fù)性好、毒性低和穩(wěn)定性*的特點,目前該轉(zhuǎn)染試劑為我公司產(chǎn)品。轉(zhuǎn)染試劑用于哺乳動物細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,如腫瘤細(xì)胞系(常見的細(xì)胞有HEK293,CHO,COS-1,COS-7,Hela,NIH3T3等)和原代培養(yǎng)的細(xì)胞以及昆蟲細(xì)胞sf9,sf21等。轉(zhuǎn)染試劑,1.0ml,可用于24孔板轉(zhuǎn)染333次或者6孔板166次轉(zhuǎn)染操作。
     
      轉(zhuǎn)染試劑由納米高分子聚合物組成,分子內(nèi)含有許多氨基,在生理PH下會發(fā)生質(zhì)子化,這些質(zhì)子化的氨基可以中和DNA質(zhì)粒表面的負(fù)電荷,使DNA分子由伸展結(jié)構(gòu)壓縮為體積相對較小的DNA粒子,并包裹在其中,使DNA免受核酸酶的降解。轉(zhuǎn)染復(fù)合物主要是通過細(xì)胞內(nèi)吞作用將DNA轉(zhuǎn)移進(jìn)入細(xì)胞,形成內(nèi)含體,DNA從內(nèi)含體釋放,進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中,再進(jìn)一步進(jìn)入核內(nèi)轉(zhuǎn)錄、表達(dá)。通過納米技術(shù)生產(chǎn)出的轉(zhuǎn)染試劑在納米尺度表現(xiàn)出結(jié)合保護(hù)DNA能力強、毒性低的*性能。
     
      轉(zhuǎn)染試劑的應(yīng)用:
      將DNA導(dǎo)入哺乳動物細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞。
      同病毒協(xié)同轉(zhuǎn)染難轉(zhuǎn)哺乳動物細(xì)胞,可顯著增強病毒的轉(zhuǎn)染效率。
     
      轉(zhuǎn)染試劑的使用及效果:
      將2μg無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA和4μL本產(chǎn)品分別稀釋到50μL溶液A中,將上述兩溶液混勻,加入到在1mL培養(yǎng)基中生長了18-24小時、覆蓋率達(dá)到50-80%的培養(yǎng)細(xì)胞中,輕搖以混勻,然后在37℃/5%CO2孵箱中培養(yǎng),24-72小時后根據(jù)實驗需要進(jìn)行瞬時表達(dá)分析或穩(wěn)定細(xì)胞系加壓篩選。
      轉(zhuǎn)染試劑主要用于哺乳動物細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞的瞬時轉(zhuǎn)染以及穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建,可以將轉(zhuǎn)染實驗操作縮短到一分鐘即可完成。本產(chǎn)品具有下列特點:
      1、本產(chǎn)品和質(zhì)粒混合后無需室溫靜置孵育,直接轉(zhuǎn)染。
      2、毒性低,轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高。
      3、適合于多種常用的細(xì)胞系。
      4、可直接加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)基中進(jìn)行轉(zhuǎn)染,而且無需在轉(zhuǎn)染后補加血清和更換超快轉(zhuǎn)染試劑盒培養(yǎng)基。
      5、如果實驗?zāi)康脑谟诤Y選抗藥性穩(wěn)定細(xì)胞系,可以在細(xì)胞傳代后可直接進(jìn)行轉(zhuǎn)染實驗,不需轉(zhuǎn)染前細(xì)胞培養(yǎng)時間。
      6、無需在轉(zhuǎn)然后4-6小時補加血清或更換培養(yǎng)基。
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